毛茛為毛茛科毛茛屬多年生草本植物。近年來(lái)從毛茛中分離出一系列以白頭翁素為代表的內(nèi)酯化合物，并證實(shí)了其獨(dú)特的抗菌消炎、抗病毒、抗癌和增強(qiáng)免疫功能的作用。為了控制毛茛的質(zhì)量，本文上海昌吉地質(zhì)儀器有限公司采用高效液相色譜法測(cè)定毛茛中白頭翁素的含量，為今后該藥的開(kāi)發(fā)利用提供有效的參考。
1 儀器
Agress1100高效液相色譜儀(大連依利特分析儀器有限公司，包括UV1201紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器，化學(xué)工作站，G1329A標(biāo)準(zhǔn)型自動(dòng)進(jìn)樣器) ，METTLERAE240 型電子分析天平(梅特勒-托利多公司，0.1mg);BS-124S 電子天平(德國(guó)賽多利斯公司，0.1mg) ;超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司) 。
2討論
2.1 含量測(cè)定項(xiàng)指標(biāo)的選擇 近年來(lái)從毛茛中分離出了一系列以原白頭翁素為代表的內(nèi)酯化合物，并且證實(shí)了其具有抗菌、抗病毒和抗癌的藥理作用，而白頭翁素是其主要的活性成分。毛茛在全國(guó)大部分省份有分布，由于受氣候、環(huán)境等條件的影響，其質(zhì)量有較大的差別，因此有必要測(cè)定其活性成分的含量，為其今后進(jìn)行大規(guī)模的產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)作準(zhǔn)備，也為臨床合理用藥提供參考。
2.2 提取方法的優(yōu)化 因白頭翁素微溶于冷水，溶于熱水、三氯甲烷、熱乙醇、二氯甲烷等溶劑分子量小，因此我們參照相關(guān)文獻(xiàn)并進(jìn)行考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)75%的乙醇、100%的甲醇、水均能有效提取白頭翁素，但用水提雜質(zhì)過(guò)多，而乙醇價(jià)格遠(yuǎn)低于甲醇，因此選取75%的乙醇。采用75%的乙醇超聲萃取30min時(shí)幾乎能達(dá)到最大萃取，因此選用75%的乙醇超聲萃取30min。
2.3 流動(dòng)相的選擇 通過(guò)文獻(xiàn)查閱，白頭翁素的含量測(cè)定色譜條件有以甲醇-水(27：73)為流動(dòng)相，也有乙腈-0.1%磷酸(15∶85)、乙腈-0.1%磷酸(20：80)、甲醇-0.05mol /L磷酸二氫鈉(30:70)。經(jīng)試驗(yàn)，本文采用流動(dòng)相為甲醇-水(30∶70) 為流動(dòng)相，避免采用無(wú)機(jī)鹽溶液，在獲得良好分離效果的同時(shí)又可以避免無(wú)機(jī)鹽溶液對(duì)色譜柱的損害。
2.4 流速的選擇流動(dòng)相流速考察了1.0ml/min和0.8ml/min，流速為1.0ml/min的條件下，基線不穩(wěn)定，將流速降到0.8ml/min基線限趨于平穩(wěn)，使白頭翁素得到良好的分離，故確定流速為0.8ml/min。
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